標(biāo)準(zhǔn)品制備有關(guān)信息

本公司是一家技術(shù)服務(wù)型渠道企業(yè),在行業(yè)發(fā)展中所承擔(dān)的角色是一種溝通產(chǎn)出方和需求方（科研和市場(chǎng)）的媒介，我們致力為行業(yè)人才提供了包括科研在內(nèi)的更多出口，為科研提供了有力的硬件支持，有效地促進(jìn)科研和市場(chǎng)需求結(jié)合，提高了科研成果的轉(zhuǎn)化效率，使得科研更具活力。目前國(guó)家對(duì)于生物行業(yè)的發(fā)展給予了極大的重視，但更多地側(cè)重于科研的投入，行業(yè)內(nèi)缺乏*的技術(shù)服務(wù)體系和渠道支撐...

1. 定量定義 定量是用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線來推算未知樣品的量。 將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至不同濃度，作為模板進(jìn)行 PCR 反應(yīng)。以標(biāo)準(zhǔn)品拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)值為 橫坐標(biāo)，以測(cè)得的 CT 值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)未知樣品進(jìn)行定量時(shí)，根據(jù)未知樣品 的 CT 值，即可在標(biāo)準(zhǔn)曲線中得到樣品的拷貝數(shù)。 （起始濃度）與循環(huán)數(shù)呈線性關(guān)系， 通過已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品可作出標(biāo)準(zhǔn)曲線， 即得 到該擴(kuò)增反應(yīng)存在的線性關(guān)系 * 由樣品 CT 值，就可以計(jì)算出樣品中所含的模板量

2. 定量標(biāo)準(zhǔn)品 標(biāo)準(zhǔn)品的一些標(biāo)準(zhǔn) * 必須用與擴(kuò)增目的基因相同的引物進(jìn)行擴(kuò)增，并且擴(kuò)增效率相同 * 標(biāo)準(zhǔn)品必須是經(jīng)過準(zhǔn)確定量的（我們通常用的是 ASP-3700 紫外光/可見光微量分光光度 計(jì)） * 標(biāo)準(zhǔn)品必須是標(biāo)準(zhǔn)化的（例如，同一化的細(xì)胞數(shù)） * 在每組實(shí)驗(yàn)時(shí)，必須用相同的閾值設(shè)定來確定 CT 值 標(biāo)準(zhǔn)品可以是含有目的基因的線性化的質(zhì)粒 DNA，也可以是比擴(kuò)增片段長(zhǎng)的純化 后的 PCR 產(chǎn)物，當(dāng)然也可以是基因組 DNA，甚至 cDNA，但前提是所有的作為標(biāo)準(zhǔn)品的核 酸都必須保證穩(wěn)定。

3. 標(biāo)準(zhǔn)品的制備
一般一條標(biāo)準(zhǔn)曲線取四到五個(gè)點(diǎn)， 濃度范圍要能覆蓋樣品的濃度區(qū)間， 以保證定量
的準(zhǔn)確性。 一般一個(gè)點(diǎn)重復(fù)三至五次， 對(duì)于常期穩(wěn)定使用的標(biāo)準(zhǔn)品可以適當(dāng)減少重復(fù)的次數(shù)。 倍比梯度稀釋方法： 1v 原液（標(biāo)準(zhǔn)品 i）+9v 稀釋緩沖液，得標(biāo)準(zhǔn)品 ii 1v 標(biāo)準(zhǔn)品 ii+9v 稀釋緩沖液，得標(biāo)準(zhǔn)品 iii 1v 標(biāo)準(zhǔn)品 iii+9v 稀釋緩沖液，得標(biāo)準(zhǔn)品 iv 1v 標(biāo)準(zhǔn)品 iv+9v 稀釋緩沖液，得標(biāo)準(zhǔn)品 v 依次倍比稀釋 拷貝數(shù)的計(jì)算：詳見核酸拷貝數(shù)的計(jì)算

4. 實(shí)例標(biāo)準(zhǔn)品的制作：將標(biāo)準(zhǔn)品依次進(jìn)行 10 倍稀釋，ASP-3700 測(cè)得其拷貝數(shù) 1.55×108copy /ul 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制（1cycle=1min） 設(shè)置對(duì)照：濃度為 1.55×107、1.55×106、1.55×105、1.55×104、1.55×103、1.55×102、 1.55×101 的標(biāo)準(zhǔn)樣品各一個(gè)，設(shè)空白對(duì)照 PCR 反應(yīng)：以不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品作為模板
公司代理經(jīng)銷各類ELISA試劑盒,是中國(guó)ELISA試劑盒商之一。產(chǎn)品貨期快、質(zhì)量品牌保障，歡迎各位新老客戶惠顧!